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大肠杆菌发酵与收集的实验步骤

发布时间:2014-9-12 11:34:42??????点击:

 1、种子接种:将冻干管或甘油管种子接种到LB培养基摇瓶中进行活化,一般可以加抗性标记对应的抗生素。然后摇床恒温培养。

 2、发酵培养基准备:摇瓶的话好说,灭菌锅就行。发酵罐的话,要先将罐子清洗干净,然后配料,然后灭菌。

 3、将培养好的种子液,按一定的接种量接到发酵培养基中。如果是摇瓶发酵的话一般不用中控,时间到了放瓶即可。如果是发酵罐发酵的话,中间过程需要补料、调节PH值、控制好溶氧转速等等。要注意取样时样液的密封性,如果样液到处乱撒,容易导致噬菌体污染。

 4、不论是产酶、蛋白、氨基酸还是别的什么,产物量都是必须检测的哦。

 5、放罐后,也要注意料液的收集、使用和灭活,严防噬菌体污染。

 6、发酵好的大肠杆菌通过离心机高速分离20分钟,离心内腔温度控制在4℃,去掉上清液,然后收集大肠杆菌,再进行冷冻干燥。


  收集大肠杆菌的关键仪器是选用离心的机器,上海卢湘仪离心机推荐选用GL-21M落地式高速澳门网站网址,配500ml*6的铝合金角转子,也可以选用GL-12M大容量澳门网站网址配1000ml*6的铝合金角转子。

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